لپڈ ڈراپلٹس فلوروسینس پرکھ کٹ

 

پروڈکٹ کا نام	بلی نہیں	سپیک
لپڈ ڈراپلٹس فلوروسینس پرکھ کٹ	G1905-100T	100 T

 

 

لپڈ بوندیں خلیات میں خصوصی لپڈ اسٹوریج آرگنیلز ہیں، جو خلیات میں غیر جانبدار لپڈ کے ذخیرہ اور ہائیڈولیسس کو منظم کرسکتے ہیں اور خلیوں کے لئے متحرک توانائی کا توازن فراہم کرسکتے ہیں۔ اس کے علاوہ، لپڈ بوندیں cytoskeleton کے ساتھ ساتھ حرکت کرنے اور دوسرے organelles کے ساتھ تعامل کرنے کے قابل ہوتی ہیں، جو سگنل کی نقل و حمل کے ضابطے میں اہم کردار ادا کرتی ہیں۔ سیلولر لپڈ بوندوں کا غیر معمولی جمع متعدد قسم کے میٹابولک امراض میں ہوتا ہے، جیسے موٹاپا، فیٹی جگر، قلبی امراض، اور پیتھولوجیکل حالت۔

Lipid Droplet Fluorescence Assay Kit BODIPY 493/503 پر مبنی ہے، جو ایک lipophilic fluorescent probe ہے جو قطبی لپڈز کو مقامی بنانے کی صلاحیت رکھتا ہے، اور اسے خلیات اور ٹشوز کے غیر جانبدار لپڈ مواد کو کیلیبریٹ کرنے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ اس کٹ کو ہماری طرف سے بہتر بنایا گیا ہے R&D ٹیم، اور اس کے متعدد فوائد ہیں جیسے استعمال میں آسان، مستحکم کارکردگی اور اچھی تولیدی صلاحیت، وغیرہ۔ انٹرا سیلولر لپڈ مواد جتنا زیادہ ہوگا، فلوروسینس کی شدت اتنی ہی زیادہ ہوگی، جس کا پتہ فلوروسینس مائکروسکوپ اور فلو سائٹو میٹر سے لگایا جاسکتا ہے۔ اس کے علاوہ، یہ کٹ ٹرائگلیسرائڈ کی ترکیب اور ذخیرہ کرنے کے ایک محرک کے طور پر اولیک ایسڈ بھی فراہم کرتی ہے، جسے مثبت کنٹرول انڈکشن کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔

 

 

خشک برف کے ساتھ جہاز؛ روشنی سے -20 ڈگری پر 6 ماہ تک اسٹور کریں۔

 

 

اجزاء نمبر	جزو	G1904-100T
G1905-1	لپڈ قطرہ پرکھ کی تحقیقات (2 ایم ایم)	100 μL
G1905-2	لپڈ ڈراپلیٹ پرکھ بفر	100 ملی لیٹر
G1905-3	مثبت محرک (500 ایم ایم)	50 μL
دستی		1 پی سی

 

نوٹ: مندرجہ بالا رد عمل کے اوقات ایک 6-وییل پلیٹ سسٹم کے لیے پرکھے گئے ہیں۔

 

 

نوٹ: مثال کے طور پر 6-اچھی طرح سے پلیٹ ایڈرینٹ سیلز کو لیں، جب بھی مائع تبدیل کیا جائے تو معطلی سیل کو سینٹرفیوج کرنے کی ضرورت ہوتی ہے۔ ٹشو کے نمونے براہ راست سٹیننگ اور لیبلنگ کے مراحل کا حوالہ دیتے ہیں، اور استعمال شدہ ریجنٹس کا مجموعی حجم صورتحال کے مطابق ایڈجسٹ کیا جاتا ہے۔ اگر ضروری ہو تو، نمونے پہلے سے طے کیے جاسکتے ہیں، لیکن براہ کرم نمونوں کو سوراخ کرنے سے گریز کریں۔

1. لپڈ ڈراپلیٹ پرکھ کے لیے ورکنگ سلوشن کی تیاری اور لپڈ ڈراپلیٹ انڈکشن کے لیے ورکنگ سلوشن:

1.1 لپڈ ڈراپلیٹ پرکھ کی جانچ (2 ایم ایم) اور لپڈ ڈراپلیٹ پرکھ بفر کی مناسب مقدار لیں، 1 : 500-2000 کے تناسب سے اچھی طرح مکس کریں، اور لپڈ ڈراپلیٹ پرکھ کے لیے کام کرنے والا حل تیار کریں۔

1.2 مثبت انڈیسر (500 ایم ایم) کی مناسب مقدار لیں اور متعلقہ ٹیسٹ سیلز کے سیل کلچر میڈیم کا استعمال کریں تاکہ اسے 400-1000 uM تک پتلا کیا جاسکے، اور اضافی استعمال کے لیے لپڈ ڈراپلیٹ انڈکشن ورکنگ سلوشن تیار کریں (یہ ارتکاز ایک حوالہ ہے۔ رینج، اور خلیوں کی نوعیت یا دیگر حالات کے مطابق مناسب طریقے سے ایڈجسٹ کیا جا سکتا ہے)۔

2. مثبت کنٹرول گروپ اور منشیات اور دیگر علاج (6-اچھی طرح سے پلیٹ ایڈرینٹ سیلز، مثال کے طور پر، معطلی سیل ہر بار مائع کی تبدیلی، براہ کرم سینٹرفیوگریشن انجام دیں):

2.1 خلیات کو ضرورت کے مطابق 6-کنویں پلیٹوں میں پہلے سے لگایا جاتا ہے (پرکھ اور آلات کے لحاظ سے کرالر کے ساتھ یا اس کے بغیر)؛

2.2 اصل سیل کلچر میڈیم کو ہٹا دیں اور PBS یا دیگر بفرز سے دو بار دھوئیں؛

2.2.1 تجرباتی گروپ: جن خلیوں کی جانچ کی جانی ہے ان پر منشیات کی حوصلہ افزائی یا دیگر متعلقہ علاج کیے جاتے ہیں، اور انکیوبیشن کا مطلوبہ وقت آپ خود طے کرتے ہیں۔

2.2.2 مثبت کنٹرول گروپ: 1 ملی لیٹر لپڈ ڈراپلیٹ انڈکشن ورکنگ سلوشن کو ویل پلیٹ میں شامل کیا جاتا ہے، جسے رات بھر انکیوبیشن کے لیے انکیوبیٹر میں رکھا جاتا ہے۔

2.3۔ انکیوبیشن کے اختتام پر، سٹین لیبلنگ کے لیے مرحلہ 3 پر جائیں۔

3. لپڈ قطرہ داغ مارکر:

3.1 سیلوجینک میڈیم کو ہٹائیں اور PBS یا دیگر بفرز سے 2-3 بار دھوئیں؛

3.2 واش بفر کو ہٹا دیں، 1 ملی لیٹر Lipid Droplet Assay ورکنگ سلوشن شامل کریں اور ہلکی ہلکی ہلکی ہلکی ہلکی ہلکی کے ساتھ ملائیں۔

3.3 روشنی سے محفوظ CO2 انکیوبیٹر میں 15 منٹ تک انکیوبیٹ کریں۔

3.4 انکیوبیشن کے بعد، اسے پی بی ایس یا دیگر بفروں سے دو بار دھوئیں، اور اسے نیوکلی اور دیگر آپریشنز سے مزید داغ دیا جا سکتا ہے یا تجرباتی ضروریات کے مطابق مناسب آلات سے اس کا پتہ لگایا جا سکتا ہے۔

4. لپڈ قطرہ کا پتہ لگانا:

4.1 انکیوبیشن کے بعد اور 3.4 میں دھوئے جانے والے نمونے کا مناسب طریقہ اور آلات کا استعمال کرتے ہوئے تجزیہ کیا جاتا ہے، جس پر گرین فلوروسینس، EX/EM 493/503 nm کا لیبل لگا ہوا ہے، اور آلات کی کھوج کی کچھ مثالیں ذیل میں دی گئی ہیں۔

4.1.1 براہ راست یا اینٹی فلوروسینس بجھانے والے سیلنگ سلوشن (آئٹم نمبر G1401) کے ساتھ، فلم کو سیل کر دیا جاتا ہے اور پھر پتہ لگانے اور تجزیہ کے لیے فلوروسینس مائکروسکوپ کے نیچے رکھا جاتا ہے۔

4.1.2 ٹرپٹک ڈائجسٹ کا استعمال کرتے ہوئے عمل انہضام اور بحالی کے بعد (معطلی کے خلیات استعمال نہیں کیے جاتے ہیں)، خلیات کا پتہ لگایا جاتا ہے اور بہاؤ سائٹومیٹری کا استعمال کرتے ہوئے تجزیہ کیا جاتا ہے۔

 

 

1. خلیات کی مختلف اقسام اور خصوصیات کی وجہ سے، مثبت inducers اور تحقیقات کے ارتکاز اور انکیوبیشن کے وقت کو تجربے کی ضروریات کے مطابق مناسب طریقے سے ایڈجسٹ کیا جا سکتا ہے۔

2. نمونوں کو پرکھ کی درستگی میں مداخلت کرنے سے بچنے کے لیے نامیاتی سالوینٹس یا لپڈس کو متاثر کرنے والے دیگر اجزاء کے ساتھ رابطے سے گریز کرنا چاہیے۔

3. فلوروسینٹ رنگ بجھانے کے تابع ہیں، اور اس عمل کو روشنی سے محفوظ کیا جانا چاہیے۔

4. اپنی صحت اور حفاظت کے لیے، براہ کرم آپریشن کے دوران لیب کوٹ اور دستانے پہنیں۔

 

صرف تحقیقی استعمال کے لیے!

 

 

ڈاؤن لوڈ، اتارنا ٹیگ: لپڈ بوندوں فلوروسینس پرکھ کٹ، چین لپڈ بوندوں فلوروسینس پرکھ کٹ مینوفیکچررز، سپلائرز، فیکٹری