پلانٹ ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ سٹیننگ مائع (DAB)

پودوں کے ٹشوز تناؤ کے حالات میں مختلف قسم کے رد عمل آکسیجن پرجاتیوں (ROS) پیدا کرتے ہیں۔ ROS کی سرگرمی بہت بڑی اور انتہائی غیر مستحکم ہے، لہذا ROS کا پتہ لگانے کا انحصار عام طور پر اس کی حتمی مصنوعات پر ہوتا ہے۔ ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ رد عمل آکسیجن کی ایک قسم ہے۔ کیٹالیس کے ذریعے کیٹیلائزڈ، ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ DAB (3, 3-diaminobenzidine tetrahydrochloride) کے ساتھ تیزی سے رد عمل ظاہر کر کے ایک بھورے سرخ مرکب بنا سکتا ہے، تاکہ ٹشوز میں ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ کو تلاش کیا جا سکے۔ بنیادی اصول کے مطابق اسے DAB طریقہ بھی کہا جاتا ہے۔ مندرجہ بالا اصول کی بنیاد پر، اس پروڈکٹ کو پودوں کے زندہ بافتوں میں ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ کے داغ کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ یہ عام طور پر ٹینڈر جڑوں کے اشارے، پتیوں اور دیگر مجموعی داغوں پر لاگو ہوتا ہے، داغ لگانے کے بعد ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ جمع ہونے کی جگہ بھوری سے گہرے بھوری ہوتی ہے۔

گیلی برف کی نقل و حمل؛ 2-8 ڈگری پر اسٹور کریں، 12 ماہ کے لیے درست۔

1. ریجنٹ کی تیاری: ڈی اے بی سٹیننگ ورکنگ سلوشن حاصل کرنے کے لیے 100 ملی گرام ڈی اے بی کو 100 ملی لیٹر فاسفیٹ بفر میں مکمل طور پر تحلیل کیا گیا تھا، جسے 4 ڈگری پر روشنی کے نیچے ذخیرہ کیا گیا تھا اور ایک ہفتے کے اندر موثر تھا۔ نوٹ: DAB روشنی کے لیے حساس ہے اور اسے تحلیل کے عمل کے دوران روشنی سے بچانے کی ضرورت ہے۔ اگر اسے تحلیل کرنا مشکل ہو تو، الٹراسونک اور مقناطیسی ہلچل کے ذریعے تحلیل کو فروغ دیا جا سکتا ہے۔

2. تناؤ کے زیر اثر پودوں کی جڑوں یا جڑوں کی نوکوں کو جمع کریں (جیسے بھاری دھاتیں)، انہیں صاف پانی سے تھوڑا سا دھوئیں، اور اضافی پانی کو نکالنے کے لیے فلٹر پیپر پر رکھیں۔ پودے کے پودوں یا جڑوں کی نوکوں کو کمرے کے درجہ حرارت پر DAB اسٹیننگ ورکنگ ڈائی سلوشن میں ڈبو دیا گیا اور اسے 2-6 گھنٹے تک روشنی سے دور رکھا گیا جب تک کہ مثبت حصہ گہرا بھورا نظر نہ آئے، اور باقی حصے تقریباً بے رنگ ہو گئے یا پودے کا رنگ ظاہر نہ ہو جائے۔ خود (رنگنے کے وقت کو جوانی کی ڈگری اور پودوں کی رنگت کے مطابق ایڈجسٹ کریں)

3. پودوں کے پودوں یا پتوں کو احتیاط سے چمٹی سے نکالیں، انہیں خالص پانی میں ڈبوئیں اور انہیں آگے پیچھے 3-5 بار دھوئیں، اضافی پانی کو ختم کرنے کے لیے انہیں فلٹر پیپر پر رکھیں، اور پھر انہیں 95٪ ایتھنول میں ڈبو دیں۔ 40 ڈگری پر 3-16 گھنٹے کے لیے۔ اس کا مقصد پودوں کے پودوں یا پتوں کے کلوروفل کو خود سے ہٹانا ہے، اور تازہ 95% ایتھنول کو رنگین ہونے کے دوران کئی بار تبدیل کیا جا سکتا ہے۔

4. پودوں یا پتوں کو چمٹی سے نکالیں، انہیں خالص پانی میں ڈبوئیں اور انہیں 3-5 بار آگے پیچھے دھوئیں، انہیں فلٹر پیپر پر رکھیں تاکہ اضافی پانی کو ختم کیا جا سکے، نمونوں کو مناسب مقدار میں DAB نمونے میں منتقل کریں۔ محفوظ کرنے کا حل اور انہیں 30 منٹ تک بھگو دیں، پھر فوٹو لیں۔ نمونے ایک ہفتے کے لیے کمرے کے درجہ حرارت پر محلول میں محفوظ کیے جا سکتے ہیں۔

1. DAB سٹیننگ ورکنگ سلوشن تیار ہونے کے بعد، اسے 4 ڈگری پر ذخیرہ کیا جانا چاہیے اور روشنی سے دور رکھنا چاہیے، اور ایک ہفتے کے اندر استعمال کرنا چاہیے۔ ذخیرہ کرنے کا وقت بہت طویل ہے، رنگ کو متاثر کرے گا۔

2. چونکہ ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ گلنا آسان ہے اور کوئی بھی بیرونی عوامل پودوں کو ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ پیدا کرنے کے لیے دباؤ ڈال سکتے ہیں، اس لیے پودوں کے نمونوں کو جلد از جلد تازہ اور داغدار کرنے کی ضرورت ہے۔ منفی اور مثبت خالی کنٹرول گروپ کی سفارش کی جاتی ہے۔

3. نمونے کے داغ لگنے کے بعد نتائج کو بچانے کے لیے جلد از جلد تصاویر لیں۔

4. آپریشن کے دوران لیب کوٹ اور ڈسپوزایبل دستانے پہنیں۔

صرف تحقیقی استعمال کے لیے!

ڈاؤن لوڈ، اتارنا ٹیگ: پلانٹ ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ سٹیننگ مائع (ڈیب)، چین پلانٹ ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ سٹیننگ مائع (ڈیب) مینوفیکچررز، سپلائرز، فیکٹری