ہائبرڈوما سیل مخصوص سیرم/پروٹین سے پاک نان-گریڈینٹ سیل فریزنگ میڈیم

ہائبرڈوما سیلز کے لیے سیرم فری پروٹین فری نان پروگرامڈ سیل کریوپریزرڈ سلوشن استعمال کے لیے تیار نان پروگرامڈ سیل کریوپریزرڈ سلوشن ہے جس میں واضح کیمیکل کمپوزیشن، کوئی سیرم، کوئی پروٹین نہیں اور DMSO پر مشتمل ہے۔ یہ پروڈکٹ کیمیاوی طور پر بیان کردہ اور سیرم سے پاک ہے، جو سیل کے منجمد ہونے پر سیرم بیچ کی عدم استحکام اور نامعلوم ساخت کے غیر مستحکم نتائج سے مؤثر طریقے سے بچ سکتی ہے۔ سیرم سے پاک اور پروٹین سے پاک، کچھ مخصوص خلیوں پر بعض پروٹینوں کے ممکنہ اثرات سے بچا جا سکتا ہے اور سیرم فری کلچر سیلز یا کرائیو پریزرویشن کے لیے ظاہر کردہ خلیوں پر لاگو کیا جا سکتا ہے۔ اس کے علاوہ، روایتی کریوپریزرویشن میڈیم کے مقابلے میں، یہ پروڈکٹ نان گریڈینٹ فریزنگ لیتی ہے، صرف اس پروڈکٹ کے ساتھ سیلز کو دوبارہ معطل کرنے اور انہیں براہ راست -80 ڈگری ریفریجریٹر میں ڈالنے کی ضرورت ہے، جس سے تکلیف دہ گریڈینٹ فریزنگ کے آپریشن کو ختم کیا جا سکتا ہے۔

اس پروڈکٹ کو ہماری تکنیکی ٹیم نے مسلسل بہتر اور ڈیبگ کیا ہے، اور جب کہ اس میں مندرجہ بالا فوائد ہیں، یہ پانی کے کرسٹلائزیشن کے عمل کو بہت کمزور کرتا ہے، خلیات کو محلول کو پہنچنے والے نقصان سے بچاتا ہے، اور پگھلنے کے بعد مؤثر طریقے سے عمل اور سیل کی بحالی کو بہتر بناتا ہے۔ حساس سیل لائنوں جیسے ہائبرڈوما کے لیے خصوصی اصلاح کی جاتی ہے، جو پوری پلیٹ کو ہضم کیے بغیر ہائبرڈوما کے خلیات کے براہ راست منجمد ہونے میں مدد کر سکتی ہے۔

گیلی برف کے ساتھ جہاز؛ روشنی سے دور 2-8 ڈگری پر اسٹور کریں، 12 ماہ کے لیے درست۔

1. ہائبرڈوما روٹین کریوپریزرویشن اسکیم:

1.1 اچھی حالت میں ہائبرڈوما کے خلیات کو روایتی طریقوں کے مطابق سینٹری فیوج ٹیوبوں میں جمع کیا جاتا ہے۔

1.2 3-5منٹ کے لیے 800-1200rpm/min پر سینٹری فیوج، سپرناٹینٹ کو ہٹا دیں، اور سیل کی ترسیب برقرار رکھیں؛

1.3 ہائبرڈوما سیلز کے لیے سیرم فری پروٹین فری نان پروگرامڈ منجمد محلول شامل کرنا، بھاری سسپینشن سیلز کو آہستہ سے اڑا دیں، اور سیل کی کثافت 1×106~5×106/mL کے اندر کنٹرول کی جاتی ہے۔

1.4 مندرجہ بالا سیلولر فریز-سٹوریج سلوشن کو سیل فریز-سٹوریج ٹیوب میں مناسب حجم میں منتقل کریں (1mL/ برانچ کی سفارش کی جاتی ہے)؛

1.5 سیل کرائیوٹوبس کو براہ راست -80 ڈگری ریفریجریٹر میں منجمد کریں۔

1.6۔ اگلے دن طویل مدتی اسٹوریج کے لیے مائع نائٹروجن ٹینک میں منتقلی، مختصر مدت کے لیے -80 ڈگری ریفریجریٹر میں بھی رکھی جا سکتی ہے۔

2. سب کلوننگ کے دوران ہائبرڈوما فل پلیٹ فریزنگ پروٹوکول (96-مثال کے طور پر اچھی پلیٹ):

2.1 ہائبرڈوما سیلز کے لیے سیرم فری پروٹین فری نان پروگرامڈ کریوپریزرویشن سلوشن کو کلچر میں 37 ڈگری پر رکھ کر پہلے سے گرم کریں۔

2.2 اصل سیل کلچر میڈیم کو ہٹا دیں اور ہائبرڈوما سیلز کے لیے سیرم فری، پروٹین فری، غیر پروگرام شدہ کریوپریزریشن سلوشن کا ایک خاص حجم شامل کریں (96-کنویں پلیٹوں کے لیے 100 μL)؛

2.3۔ سیل ویل پلیٹ کے سوراخوں کو سیلنگ فلم کے ساتھ سیل کرنے کے بعد، سیل ویل پلیٹ کو براہ راست ایک -80 ڈگری ریفریجریٹر میں منجمد کرنے کے لیے رکھا گیا تھا۔

2.4 بحالی کے لیے، سیل پلیٹ کو 37 ڈگری انکیوبیٹر میں پگھلائیں (پگھلنے کو تیز کرنے کے لیے شیکر کے اوپر رکھا جا سکتا ہے)؛

2.5 پگھلنے کے بعد، سپرنٹنٹ کو براہ راست اسپائریٹ کریں اور انکیوبیشن کے لیے 200 μL تازہ میڈیم شامل کریں۔ یا خلیات کو پلیٹ کے ساتھ مکس کریں، ہر کنویں کا 30 μL ایک نئی پلیٹ میں منتقل کریں اور انکیوبیشن کے لیے 200 μL تازہ میڈیم بنائیں۔

1. ہر جزو کی یکساں تقسیم کو یقینی بنانے کے لیے استعمال سے پہلے ریجنٹ کو آہستہ سے ہلائیں۔

2. براہ کرم پروڈکٹ کو کھولنے کے بعد 3 ماہ کے اندر استعمال کریں، اسے بھی تقسیم کیا جا سکتا ہے اور طویل مدتی اسٹوریج کے لیے -20 ڈگری میں رکھا جا سکتا ہے۔

3. اس بات کو یقینی بنائیں کہ خلیات منجمد ہونے سے پہلے اچھی حالت میں ہیں، اور اس بات کو یقینی بنائیں کہ سیل کرائیوٹوب پر متعلقہ مارکر بنائے گئے ہیں۔ سیل کرائیوٹوب پر مارکر کے نقصان سے بچنے کے لیے مارکر قلم استعمال کریں جو نامیاتی سالوینٹس کے خلاف مزاحم ہوں۔

4. پروڈکٹ میں ایک خاص ڈگری واسکاسیٹی ہوتی ہے، معمول کے منجمد سٹوریج پروگرام کی ریکوری کو براہ راست سینٹری فیوج نہیں کیا جاتا، اس کو پتلا کرنے کی سفارش کی جاتی ہے اور پھر سیڈ پلیٹ سے پہلے سینٹرفیوج کیا جاتا ہے۔ پروگرام کے اقدامات کی ہدایات کے مطابق پوری پلیٹ منجمد سٹوریج باہر کیا جا سکتا ہے.

5. اپنی حفاظت اور صحت کے لیے، براہ کرم حفاظتی شیشے، دستانے یا حفاظتی لباس پہنیں۔

صرف تحقیقی استعمال کے لیے!

ڈاؤن لوڈ، اتارنا ٹیگ: ہائبرڈوما سیل مخصوص سیرم/پروٹین سے پاک نان گریڈینٹ سیل فریزنگ میڈیم، چائنا ہائبرڈوما سیل مخصوص سیرم/پروٹین فری نان گریڈینٹ سیل فریزنگ میڈیم مینوفیکچررز، سپلائرز، فیکٹری